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乳鼠成骨细胞培养实验

乳鼠成骨细胞培养实验

乳鼠成骨细胞培养实验应该去哪里?北检院检测平台可依据相应检测标准可提供乳鼠成骨细胞培养实验服务,亦可根据客户需求设计方案,为客户提供非标检测服务。北检院拥有丰富的检测研发经验,可为您提供相关参考,帮您快速找准产品项目,服务快捷。

  • 发布时间: 2022-04-19 17:23:28
  • 关键词:乳鼠成骨细胞培养实验
  • 检测周期7-15个工作日
  • 浏览次数:

检测详情

北检院检测机构介绍

乳鼠成骨细胞培养实验应该去哪里?北检院检测平台为综合性第三方检测机构,具有丰富的检测经验。北检院毒理实验室,可根据乳鼠成骨细胞培养实验的相关检测标准,并提供乳鼠成骨细胞培养实验报告,可在全国范围内使用并被认可。

实验周期:具体实验周期您可咨询实验室工程师,为您解答。

实验费用:工程师根据检测项目进行报价

实验方法

取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法。

乳鼠成骨细胞培养实验

实验步骤

1. 拉颈处死24 小时内新生的SD大鼠,75%乙醇浸泡5 min,取出头盖骨,分离顶骨和额骨,冰生理盐水液反复洗涤大鼠乳鼠颅盖骨标本除去脂肪组织及残留血,放入另一盛有F12 完全培基液的培养皿中再洗涤, 将颅骨剪成2~5 mm2 碎片,将洗涤过的骨碎片用 0.25%胰蛋白酶2 ml 预消化15 min,以清除纤维组织细胞,弃去上清液(其中主要含成纤维细胞)。

2. 然后以0.1% Ⅱ型胶原酶10 ml,在37℃环境中消化 20 分钟,室温下磁力搅拌消化20 分钟。静置数分钟,收集消化液,室温下以1200 rpm离心10 分钟。去除上清液,用20% 胎牛血清的F12 培养液4 ml 悬 浮细胞,接种于75 ml 培养瓶中,补培养液8 ml 使每瓶液体量达到12 ml;对静置后沉淀部分可再重复以胶原酶消化20 分钟、磁力搅拌消化15 分钟、离心10 分钟,将获得的3 瓶细胞放置于二氧化碳培养箱,在5% CO2,95%空气,37℃温度下培养,24 小时后可见细胞贴壁生长,胞质开始伸展,换新鲜培养液,以后每隔48 小时换培养液(注:消化视具体情况而定,也可多消化 1 遍)。

3. 原代培养一般接种后第7 天能长满。传代时,取生长良好、贴壁松紧适度的成骨细胞 1 瓶,弃去培养 液,传代时先以 PBS 冲洗 2 遍,加 0.25%胰酶1 ml,室温下消化3~5 分钟,将胰蛋白酶液弃去,加 F12 培养液充分吹打8-10 分钟。将已消化的细胞收集、合并,计数;用 F12 完全培基调节至细胞浓度为合适浓 度。一般取2-5 代成骨细胞进行实验。代数太多,细胞老化或者分化明显。

鉴定的方法

1. 碱性磷酸酶检测

2. 骨玻璃样蛋白(BGP)检测

3. 矿化结节检测

北检院检测服务流程是什么?

1、确定需求,与工程师进行沟通,提供方案。

2、接收样品,多渠道接收样品(支持邮寄、上门取样)。

3、分析检测,工程师进行样品检测。

4、出具报告,根据样品检测结果,提供科学严谨的报告。

5、售后服务,寄送发票及报告,跟进后续技术支持。

以上就是关于乳鼠成骨细胞培养实验的相关内容,更多检测需求,你可联系我们在线实验室工程师,为您详细洽谈实验周期及流程问题!

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