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肺纤维化动物模型检测

肺纤维化动物模型检测

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原创版权 发布时间:2023-08-07 17:27:23 咨询量:1 来源:生物医药测试中心

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望见谅。

  北检(北京)检测技术研究院可以针对组织样品、血液样品、支气管肺泡灌洗液、细胞样品等进行检测,可提供病理学评估、免疫组化分析、肺功能评估、气道反应性评估、分子生物学分析、炎症因子检测等检测服务,能够针对国标、美标等检测标准对样品进行检测,北检院专注科研测试,致力于推动科技进步,出具的肺纤维化动物模型的检测报告多方认可。

  检测样品

  

仓鼠

  

兔子

  组织样品:肺组织样品是评估肺纤维化程度和病理变化的主要样本。可以通过动物模型诱导肺纤维化后,取得动物的肺组织样品进行病理学分析和分子生物学研究。

  血液样品:血液样品可以用于评估肺纤维化相关的生物标志物和炎症因子的变化。通过采集动物的血液样品,可以进行血清生化分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)等实验。

  支气管肺泡灌洗液(BALF):BALF是通过灌洗动物支气管肺泡腔获得的液体样本。它可以提供肺部炎症细胞、细胞因子和蛋白质等的信息,用于评估肺纤维化的炎症程度和炎症相关因子的变化。

  细胞样品:在某些情况下,可以采集肺部相关细胞样品,如肺泡巨噬细胞、肺间质细胞等,用于细胞学研究、免疫细胞分析和分子生物学实验。

  检测项目

  病理学评估;免疫组化分析;炎症因子检测;肺功能评估;气道反应性评估;分子生物学分析

  检测方法

  病理学检测:通过对动物肺组织进行组织切片、染色和显微镜观察,评估肺纤维化的程度和病理变化。常用的染色方法包括Masson's Trichrome染色、Sirius Red染色等。

  免疫组化分析:使用免疫组化技术,检测和定量肺组织中与纤维化相关的标志物。这可以通过特定抗体的染色反应来观察和定位纤维化标记物,如胶原蛋白、纤维连接蛋白等。

  分子生物学分析:使用分子生物学技术,如实时定量聚合酶链式反应(qPCR)、免疫印迹等,检测和定量肺组织中的基因表达变化。这可以用于评估纤维化相关基因、炎症相关基因等的表达水平。

  支气管肺泡灌洗液(BALF)分析:通过灌洗动物的支气管肺泡腔,收集BALF样本。该样本可以用于评估炎症细胞的数量和类型,以及炎症因子的水平。

  肺功能评估:使用肺功能测试仪器,如强迫呼气容积(FEV1)、肺活量(VC)等,评估肺纤维化对呼吸功能的影响。

  免疫学分析:通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞术等方法,检测和定量肺组织、血液样品或BALF中的炎症因子、细胞因子等。

  影像学评估:使用X射线、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)等影像学技术,评估肺纤维化的程度和肺部结构的变化。

  检测仪器

  

显微镜

  

流式细胞仪

  检测标准

  参考文献:

  SD大鼠细胞因子过表达法致肺纤维化模型步骤

  前期准备:AdTGF-β1223/225 及腺病毒空载体 -70℃保存,临用前经病毒稀释液稀释成 1×109pfu(病毒稀释液由三种溶液构成,其配制方法:A 液:NaCl 8 g,KCl 0.2 g,Na2HPO4 1.15 g,KH2PO4 0.2 g,加双蒸水定容至100 mL,高压消毒;B 液:CaCl2·2H2O 0.1 g 定容至 10 mL,高压消毒;C 液:MgCl2·6H2O 0.1 g 定容至 10 mL,高压消毒。用前取 98 mL A 液、1 mL B 液、1 mL C 液混合备用。

  操作步骤:选用 SD 大鼠,体质量(250±15) g,腹腔注射速眠新麻醉(0.4 mL·kg-1),无菌操作,剪开颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,充分暴露气管,经喉头下一次性注入 0.4 mL AdTGF-β1223/225 腺病毒液,手术 6 h 后观察并记录动物生理反应。

  模型验证:分别与造模后 d 7、d 14、d 21,麻醉后开胸,左心室插管,先灌流温热(室温)生理盐水,剪开右心耳放血,待流出液变澄清后再缓慢灌流 4% 多聚甲醛水溶液(200 mL·30 min-1)。小心摘取整个肺和心,经气管恒压(2 452 Pa)灌注 4% 多聚甲醛固定液 10 min,使肺泡恢复扩张状态。沿纵轴切取肺组织浸入 4% 多聚甲醛固定液中固定 24 h,做常规石蜡包埋、石蜡切片、HE 染色和 Mallory 染色,光镜观察、摄片。

  靶向Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤法

  靶向Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤法是利用转基因技术将白喉毒素受体与Ⅱ型肺泡上皮细胞启动子通过载体融合,白喉毒素不断刺激转基因小鼠,致肺纤维化。通过敲除特定基因或导入突变基因使基因突变也能建立肺纤维化动物模型,与肺纤维化有关的基因包括:肺表面活性蛋白C、肺表面活性蛋白A2(SFTPA2)、端粒酶逆转录酶(TERT)和端粒酶 RNA复合酶(TERC)。

  转基因方法的优势:基因技术造模方法比较于传统造模方法,靶点明确,对筛选抗纤维化药物意义重大。除此之外,通过诱导时间特定启动子,可模拟肺纤维化晚期出现的临床症状。

  转基因方法的劣势:介导转基因用的病毒载体本身具有潜在危害性,且人类肺纤维化是多基因多种因子作用的结果,因此单一的基因模型与多基因相关的肺纤维化模型存在一定差异。

检测流程

1、收到客户的检测需求委托。

2、确立检测目标和检测需求

3、所在实验室检测工程师进行报价。

4、客户前期寄样,将样品寄送到相关实验室。

5、工程师对样品进行样品初检、入库以及编号处理。

6、确认检测需求,签定保密协议书,保护客户隐私。

7、成立对应检测小组,为客户安排检测项目及试验。

8、7-15个工作日完成试验,具体日期请依据工程师提供的日期为准。

9、工程师整理检测结果和数据,出具检测报告书。

10、将报告以邮递、传真、电子邮件等方式送至客户手中。

检测实验室(部分)

检测优势

1、综合性检测技术研究院等多项荣誉证书。

2、检测数据库知识储备大,检测经验丰富。

3、检测周期短,检测费用低。

4、可依据客户需求定制试验计划。

5、检测设备齐全,实验室体系完整

6、检测工程师专业知识过硬,检测经验丰富。

7、可以运用36种语言编写MSDS报告服务。

8、多家实验室分支,支持上门取样或寄样检测服务。

结语

以上是关于肺纤维化动物模型检测的检测服务介绍,仅展示了部分检测样品和检测项目,如有其它需求或疑问请咨询在线工程师。

标签:肺纤维化动物模型;肺纤维化动物模型检测
 
咨询工程师